Оп оп все начинает складываться, если где-то запутались то можно а) посмотреть на картинку (да я ее нарисовала на куске упаковки от салата но сейчас не об этом) б) спросить меня

Едем дальше, что за радикалы, какие ацетильные группы, куда и как они цепляются и как конкретно это влияет на ДНК???

Как я и сказала выше, к этим «хвостам» может нацепляться куча всего. Обычно это метиловая группа, но так как мои мухи ещё те приколисты, конкретно у них она цепляется ну прям очень плохо и не совсем понятно из-за чего если честно, наука пока не знает на это ответов, так сказать. В связи с этим буду объяснять все на примере ацетильной группы, с которой я как раз таки и работаю.

Да кто такие эти ваши свободные радикалы??? Если убрать мракобесие с «радикалы отбирают электроны у клеток и клетки разрушаются мы все умрем!!!!!», которое очень любят проталкивать в рекламах косметических чудо-средств и БАДов, то это просто части молекул, которые никуда не присоединены и которым очень хочется куда-нибудь присоединиться из-за наличия свободного электрона. Это не всегда на что-то влияет.

В этом случае, это не рандомный и спонтанный процесс, он тщательно контролируется целой группой ферментов с общим названием ацетилтрансфераза . Уходить конкретно здесь в детали я смысла не вижу, поэтому грубо говоря, они хватают ту самую ацетильную группу из Ацетил-КоА (это суперважная молекула, но об этом попозже) и радостно ее тащат к «хвостам». А конкретно к лизину и его амино-группе.

Сейчас будет интересно, обещаю!! Это сцепление даёт забавный результат, а именно ослабление связи между ДНК и гистонами, ведя к деконденсации хроматина и к повышению восприимчивости ДНК к транскрипции! А как так? А все просто, куча лизина в «хвостах» даёт положительный заряд, который хорошо лепится к отрицательной ДНК, а добавление ацетильной группы меняет заряд на нейтральный и всё лепится уже не так здорово

Немного практической части всего этого

Здесь я сортирую мух по пробиркам с помощью самодельного эксгаустера, состоящего из носика от пипетки, марли, скотча и шланга от капельницы. Высокие технологии а вы что хотели!!!
Мухи распределяются на 3 основные группы: контроль (без каких-либо приколов), низкая концентрация бутирата в еде и высокая. Затем каждая из этих групп разбивается на две подгруппы: наличие социальной среды и ее отсутствие. Итого у меня 6 групп из 270 мух вот такие дела.

Пока что они просто чиллят в лаборатории и обжираются бутиратом, а вот в пятницу буду ставить продленное спаривание с ними. Это значит, что я буду подселять к ним самок и засекать кто, когда и кого (хехе)

Спаривание, а точнее ухаживания, это один из самых простых способов замерить социальное поведение, поэтому мне приходится сидеть 4 часа и смотреть на кучу мух которые пытаются пошпехаться

Первый эксперимент исследования завершён, осталось вбить все результаты в компьютер и начать статистический анализ! Статистику можно будет сделать двумя способами: через SPSS- программу с интерфейсом или писать свой собственный код на R. Какой из этих двух вариантов я выберу я ещё не решила, но скорее всего это будет код, потому что с крупными сетами данных это работает быстрее 💅🏻

-работать в лаборатории так интересно
Работать в лаборатории:

А вообще я микроволнирую еду для моих мух! Она состоит из сахарозы, агара, и дрожжей. Все это развозится водой и доводится до кипения. Довольно таки просто, но НЕ ТУТ ТО БЫЛО

Очень важно поймать момент, когда еда начала кипеть и вытащить ее из микроволновки, иначе рванёт и мне придётся отмывать микроволновку от всей этой радости 👍🏻

Затем по необходимости добавляем раствор бутирата и заливаем по 0.5 мл еды каждую пробирку с помощью пипетки

Тадаааа вы великолепны вы накормили 270 мух

Я же обещала что однажды допишу

И так, с ацетилированием гистонов мы разобрались, что там с бутиратом, HDAC и при чем тут мухи?

У всей этой истории есть еще и обратный процесс- деацетилирование. Как и ацетилирование, оно осуществляется группой ферментов (правда другой) с общим названием- гистондеацетилазы или HDAC. Oни отщепляют ацетильную группу от лизина на хвостах, тем самым возвращая им положительный заряд, что приводит к тому что хвосты начинают обратно хорошо лепиться к ДНК, понижая восприимчивость онной к транскрипции и трансляции (грубо говоря экспрессии генов). Бутират же подавляет их выработку и соответственно этот процесс, оставляя это окошко открытым а ДНК отлепленной

Так что там с социальной средой и мухами то в итоге!!!!

Если мухи растут в социальной среде, то продолжительность их спаривания увеличивается и какая-то из HDAC влияет на это. Конкретно как и какая не ясно, но факт остаётся фактом, мухи подверженные воздействию бутирата не выражают повышенной длительности спаривания в сравнении с нормой.

Так чем я занимаюсь в итоге

Я усложнила своё исследование. Если раньше я планировала просто посмотреть на влияние бутирата на как раз таки спаривание и на агрессию (в норме самцы становятся менее агрессивными если растут в группе, и если их накормить бутиратом и они станут более агрессивными чем без него, по моей гипотезе это будет значить что у HDAC более серьезное влияние на эпигенетический ответ социальной среде, чем мы думали), то сейчас я добавлю к этому ещё и вторую часть, в которой я буду смотреть уже в большей специфике на эти ферменты, чтобы выяснить какой из них оказывает влияние на что

Это я буду делать с помощью ауксина- растительного гормона, который неплохо работает на моих мухах (потому что они ещё те приколисты) и двусторонней системы GAL4/UAS

Про которую я обязательно как-нибудь расскажу еще

Очень хочу назвать свою диссертацию «Секс, агрессия, HDACs»