د/ناصرمهيوب العامري
تحليل قياس نسبة الكرياتينين (Creatinine) فى الدم .
الكرياتين هو مركب يتم تصنيعه بصفة أساسية فى الكبد ثم يتم نقله إلى العضلات ، حيث يتم استخدامه كمصدر طاقة لنشاط العضلات. بمجرد انتقاله للعضلة ، يتحول بعض الكرياتين بشكل تلقائى إلى الكرياتينين. تعتمد كلا من كمية الكرياتين و الكرياتينين على حجم كتلة العضلة ، لذا فإن مستويات الكرياتينين لدى الرجال تكون فى العادة أعلى منها لدى النساء وذلك بسبب زيادة العضلات عندالرجل .
يعتبر قياس الكرياتينين مؤشرا أكثر صدقا على سلامة وظيفة الكلية من قياس البولينا في الدم ، و هو كرياتين لا مائي حيث ينتج من فوسفات الكرياتين بعد فقد مجموعة الفوسفات ثم يمر بالدم إلى الكلى ليخرج مع البول ، و يتناسب تركيزه بالدم و البول تناسبا طرديا مع حجم عضلات الجسم و لا يتاثر بالأكل ، و تركيزه ثابت طوال الـ 24 ساعة ، لذلك يعتبر المقياس الأمثل لاختبار وظائف الكلى.
مستوى الكرياتينين الطبيعى في الدم يتراوح ما بين 1.5 إلى 5 مجم لكل 100 مل لتر دم (60 إلى 123 ميكرو مول لكل لتر دم).
تركيز الكرياتينين في البول حوالي 1.5 جم / 24 ساعة في الذكور ، أما تركيزه فى الإناث فهو حوالي 1.0 جم / 24 ساعة نظرا لاختلاف حجم العضلات في كل من الذكر و الأنثى.
ازدياد مستوى الكرياتينين في الدم قد ينتج عن
حالات الفشل الكلوي الحاد و المزمن.
الانسداد البولي.
بينما انخفاض مستوى الكرياتينين في الدم لا يعنى أى أهمية تشخيصية.
اختبار تصفية الكرياتينين (Creatinine Clearance Test)
يعتبر هذا التحليل أدق من التحليلين السابقين حيث يكشف عن وظيفة الكلى في الـ 24 ساعة السابقة لإجراء التحليل ، و يربط
أيضا بين نسبة الكرياتينين في كل من الدم و البول خلال الـ 24 ساعة.
تتراوح نسبته الطبيعية في الذكور ما بين 90 إلى 140 مل لتر / دقيقة ، بينما تتراوح نسبته الطبيعية في الإناث ما بين 80 إلى
.C = Uc X Tv / 24 X 60 X Sc : يلي كما حسابه يتم و ، دقيقة / لتر مل 125
حيث أن :
Uc : مستوى الكرياتينين في البول.
Sc : مستوى الكرياتينين في الدم.
Tv : حجم البول المجمع في الــ 24 ساعة.
24 ساعة هي عدد ساعات اليوم ، 60 هو عدد الدقائق في الساعة الواحدة.
تنخفض تصفية الكرياتينين في جميع الحالات التي تنخفض فيها وظيفة الكلية مثل :
استنزاف الماء.
هبوط الضغط.
ضيق الشريان الكلوي.
#د_ناصر_مهيوب_العامري
@LabMed2017
تحليل قياس نسبة الكرياتينين (Creatinine) فى الدم .
الكرياتين هو مركب يتم تصنيعه بصفة أساسية فى الكبد ثم يتم نقله إلى العضلات ، حيث يتم استخدامه كمصدر طاقة لنشاط العضلات. بمجرد انتقاله للعضلة ، يتحول بعض الكرياتين بشكل تلقائى إلى الكرياتينين. تعتمد كلا من كمية الكرياتين و الكرياتينين على حجم كتلة العضلة ، لذا فإن مستويات الكرياتينين لدى الرجال تكون فى العادة أعلى منها لدى النساء وذلك بسبب زيادة العضلات عندالرجل .
يعتبر قياس الكرياتينين مؤشرا أكثر صدقا على سلامة وظيفة الكلية من قياس البولينا في الدم ، و هو كرياتين لا مائي حيث ينتج من فوسفات الكرياتين بعد فقد مجموعة الفوسفات ثم يمر بالدم إلى الكلى ليخرج مع البول ، و يتناسب تركيزه بالدم و البول تناسبا طرديا مع حجم عضلات الجسم و لا يتاثر بالأكل ، و تركيزه ثابت طوال الـ 24 ساعة ، لذلك يعتبر المقياس الأمثل لاختبار وظائف الكلى.
مستوى الكرياتينين الطبيعى في الدم يتراوح ما بين 1.5 إلى 5 مجم لكل 100 مل لتر دم (60 إلى 123 ميكرو مول لكل لتر دم).
تركيز الكرياتينين في البول حوالي 1.5 جم / 24 ساعة في الذكور ، أما تركيزه فى الإناث فهو حوالي 1.0 جم / 24 ساعة نظرا لاختلاف حجم العضلات في كل من الذكر و الأنثى.
ازدياد مستوى الكرياتينين في الدم قد ينتج عن
حالات الفشل الكلوي الحاد و المزمن.
الانسداد البولي.
بينما انخفاض مستوى الكرياتينين في الدم لا يعنى أى أهمية تشخيصية.
اختبار تصفية الكرياتينين (Creatinine Clearance Test)
يعتبر هذا التحليل أدق من التحليلين السابقين حيث يكشف عن وظيفة الكلى في الـ 24 ساعة السابقة لإجراء التحليل ، و يربط
أيضا بين نسبة الكرياتينين في كل من الدم و البول خلال الـ 24 ساعة.
تتراوح نسبته الطبيعية في الذكور ما بين 90 إلى 140 مل لتر / دقيقة ، بينما تتراوح نسبته الطبيعية في الإناث ما بين 80 إلى
.C = Uc X Tv / 24 X 60 X Sc : يلي كما حسابه يتم و ، دقيقة / لتر مل 125
حيث أن :
Uc : مستوى الكرياتينين في البول.
Sc : مستوى الكرياتينين في الدم.
Tv : حجم البول المجمع في الــ 24 ساعة.
24 ساعة هي عدد ساعات اليوم ، 60 هو عدد الدقائق في الساعة الواحدة.
تنخفض تصفية الكرياتينين في جميع الحالات التي تنخفض فيها وظيفة الكلية مثل :
استنزاف الماء.
هبوط الضغط.
ضيق الشريان الكلوي.
#د_ناصر_مهيوب_العامري
@LabMed2017
د/ناصرمهيوب العامري
طريقة عد الكريات الحمراء
RBCs Count Method .
تسحب عينة الدم بالماصه ذت الخرزة الحمراء الي 0.5 ثم نقوم بسحب المحلول النورمال سالين الي العلامة 1.1 او 101هي نفس العلامة ثم يتم المزج وتترك لمدةدقيقتين وتمزج ثم يتم سحب الماصة المطاطية ثم يتم التخلص من القطرتين الاولى بالماصة، تضع قطرتين على شريحة العد ثم تعد بالمربعات الخمسة المركزية بالمربع المركزي للشريحة ثم تحسب العدد المعدود من قانون الحساب لعد الكريات الحمراء
RBCs Count=( RBCs Numbers ) ÷ 5 x (250x200).
Or
RBCs Count=( RBCs Numbers In 5 sequers ) x 10000.
طريقة اخرى لفحص عدالكريات الحمراء
يتم وضع 4000ميكرون من N.S مع 20 ميكرون من الدم توضع في انبوبة ثم تمزج تترك لمدة 4 دقائق ثم تضع قطرتين على شريحة العد تعد بالمربعات الخمسة الوسطية بالمربع المركزي ثم تظرب العدد المعدود في 10000.
زيادة الكريات الحمراء
Polycythemia types .
Smooking.
Hypoxia.
تنقص بحالة
Anemia types .
Injuries .
Bone marrow filuer.
Bleeding .
Decreasing of RBCs production .
Increasing RBCs destruction.
طريقة عد الخلايا البيضاء
WBCs Count Method
يتم سحب عينة الدم بالماصه ذات الخرزة البيضاء الي العلامة 0.5 ثم يتم سحب بالماصة عينة من محلول GAA حتى العلامة 11 ثم يتم المزج جيداً ثم تترك لمدةدقيقتين ثم يتم سحب الماصة المطاطية ثم يتم
التخلص من اول قطرتين ثم يتم وضع قطرتين على شريحة العد ثم يتم العد في الاربعة المربعات الطرفية ثم يتم الحساب لعد الخلايا البيضاء حسب القانون لعد الخلايا البيضاء
WBCs Count= (WBCs Number in 4 sequres ) x 50.
طريقة اخرى لعد الخلايا البيضاء
يتم وضع 380 ميكرون من محلول عد الخلايا البيضاء في الانبوبة ثم يتم وضع 20ميكرون من الدم في الانبوبة ثم ترج الانبوبة جيداً ثم تترك لمدة 5دقائق
ثم يتم وضع قطرتين من العينة على شريحة العد ثم يتم العد في الاربعة المربعات الطرفية ثم تحسب العدد المعدود للخلايا البيضاء من القانون التالي
WBCs Count= (WBCs Number in 4 sequres ) x 50.
أسباب الزيادة في عدد كريات الدم البيضاء:
1. زيادة فسيولوجية أثناء الحمل والولادة ، عقب
مجهود عضلي وفي الأطفــال حديثي الولادة
(18000 .(3مم/20000 -
2. زيادة مرضية , العدوي بالميكروبات العنقودية
والسبحية مثل التهاب اللوزتين والزائدة الدودية
والتهاب حوض الكلي والدرن.
أمراض الحساسية والجلدية والطفيليات.
العدوي بالفيروسات.
الأورام الخبيثة وسرطان الدم.
الالتهابات الحادة بالدم والجسم.
أسباب النقص في عدد كريات الدم البيضاء:
العدوي ببعض الفيروسات.
فشل النخاع العظمي.
التيفود والباراتيفود.
طريقة عد الصفائح الدموية
Platelets Count Method.
يتم سحب عينة من الدم بالماصة ذات الخرزة البيضاء حتى العلامة 0.5 ثم يتم سحب بالماصة من محلول الامونيوم اكسالات حتى العلامة 11ثم يتم المزج جيداً ثم يتم وضع قطرتين من العينة على شريحة العد ثم تترك في طبق بتري يحتوي على قطعة قطن مبلله لمدة 15دقيقة ، ثم يتم العد في الخمسة المربعات الوسطية الذي يتم فيهم عد الكريات الحمراء ، ثم يتم العدد للصفائح ، ثم يتم الحساب لعدد الصفائح الدموية من القانون التالي
Platelets Count= ( Platelets Number in 5 Sequers ) x 1000.
طريقة اخرى لعد الصفائح الدموية
يتم وضع 320 ميكرون من محلول امونيوم اكسالات في انبوبة نظيفة ، ثم يتم وضع 20ميكرون من الدم في الانبوبة ثم تمزج جيداً ثم يتم وضع قطرتين من العينة على شريحة العد ثم تترك في طبق بيتري يحتوي على قطعة قطن مبلله لمدة 15دقيقة ، ثم يتم عد الصفائح الدموية في الخمسة المربعات الوسطية الذي يتم فيهم عد الكريات الحمراء ، ثم يتم حساب عدد الصفائح الدموية باستخدام القانون التالي
Platelets Count= ( Platelets Number in 5 Sequers ) x 1000.
زيادة عدد الصفائح الدموية
يحدث نتيجة وجود نزيف في الدم او حالات نقص الحديد او بعض الامراض السرطانية او مشكلة ما في نخاع العظم وينتج عن زيادة عددها عن المعدلات الطبيعية انها قد تتجمع مع بعضها داخل مجري الدم
وهذا بالطبع قد يؤدي الي تكون جلطات الدم وقد تساهم أيضًا في عملية تصلب الشرايين .
•••• نقص اعداد الصفائح الدموية
وهذا قد يكون نتيجة للحمل او فشل في نخاع العظم او التهاب شديد او تضخم في الطحال او ننيجة لنزيف حاد وحمى الظنك.
#د_ناصر_مهيوب_العامري
@LabMed2017
طريقة عد الكريات الحمراء
RBCs Count Method .
تسحب عينة الدم بالماصه ذت الخرزة الحمراء الي 0.5 ثم نقوم بسحب المحلول النورمال سالين الي العلامة 1.1 او 101هي نفس العلامة ثم يتم المزج وتترك لمدةدقيقتين وتمزج ثم يتم سحب الماصة المطاطية ثم يتم التخلص من القطرتين الاولى بالماصة، تضع قطرتين على شريحة العد ثم تعد بالمربعات الخمسة المركزية بالمربع المركزي للشريحة ثم تحسب العدد المعدود من قانون الحساب لعد الكريات الحمراء
RBCs Count=( RBCs Numbers ) ÷ 5 x (250x200).
Or
RBCs Count=( RBCs Numbers In 5 sequers ) x 10000.
طريقة اخرى لفحص عدالكريات الحمراء
يتم وضع 4000ميكرون من N.S مع 20 ميكرون من الدم توضع في انبوبة ثم تمزج تترك لمدة 4 دقائق ثم تضع قطرتين على شريحة العد تعد بالمربعات الخمسة الوسطية بالمربع المركزي ثم تظرب العدد المعدود في 10000.
زيادة الكريات الحمراء
Polycythemia types .
Smooking.
Hypoxia.
تنقص بحالة
Anemia types .
Injuries .
Bone marrow filuer.
Bleeding .
Decreasing of RBCs production .
Increasing RBCs destruction.
طريقة عد الخلايا البيضاء
WBCs Count Method
يتم سحب عينة الدم بالماصه ذات الخرزة البيضاء الي العلامة 0.5 ثم يتم سحب بالماصة عينة من محلول GAA حتى العلامة 11 ثم يتم المزج جيداً ثم تترك لمدةدقيقتين ثم يتم سحب الماصة المطاطية ثم يتم
التخلص من اول قطرتين ثم يتم وضع قطرتين على شريحة العد ثم يتم العد في الاربعة المربعات الطرفية ثم يتم الحساب لعد الخلايا البيضاء حسب القانون لعد الخلايا البيضاء
WBCs Count= (WBCs Number in 4 sequres ) x 50.
طريقة اخرى لعد الخلايا البيضاء
يتم وضع 380 ميكرون من محلول عد الخلايا البيضاء في الانبوبة ثم يتم وضع 20ميكرون من الدم في الانبوبة ثم ترج الانبوبة جيداً ثم تترك لمدة 5دقائق
ثم يتم وضع قطرتين من العينة على شريحة العد ثم يتم العد في الاربعة المربعات الطرفية ثم تحسب العدد المعدود للخلايا البيضاء من القانون التالي
WBCs Count= (WBCs Number in 4 sequres ) x 50.
أسباب الزيادة في عدد كريات الدم البيضاء:
1. زيادة فسيولوجية أثناء الحمل والولادة ، عقب
مجهود عضلي وفي الأطفــال حديثي الولادة
(18000 .(3مم/20000 -
2. زيادة مرضية , العدوي بالميكروبات العنقودية
والسبحية مثل التهاب اللوزتين والزائدة الدودية
والتهاب حوض الكلي والدرن.
أمراض الحساسية والجلدية والطفيليات.
العدوي بالفيروسات.
الأورام الخبيثة وسرطان الدم.
الالتهابات الحادة بالدم والجسم.
أسباب النقص في عدد كريات الدم البيضاء:
العدوي ببعض الفيروسات.
فشل النخاع العظمي.
التيفود والباراتيفود.
طريقة عد الصفائح الدموية
Platelets Count Method.
يتم سحب عينة من الدم بالماصة ذات الخرزة البيضاء حتى العلامة 0.5 ثم يتم سحب بالماصة من محلول الامونيوم اكسالات حتى العلامة 11ثم يتم المزج جيداً ثم يتم وضع قطرتين من العينة على شريحة العد ثم تترك في طبق بتري يحتوي على قطعة قطن مبلله لمدة 15دقيقة ، ثم يتم العد في الخمسة المربعات الوسطية الذي يتم فيهم عد الكريات الحمراء ، ثم يتم العدد للصفائح ، ثم يتم الحساب لعدد الصفائح الدموية من القانون التالي
Platelets Count= ( Platelets Number in 5 Sequers ) x 1000.
طريقة اخرى لعد الصفائح الدموية
يتم وضع 320 ميكرون من محلول امونيوم اكسالات في انبوبة نظيفة ، ثم يتم وضع 20ميكرون من الدم في الانبوبة ثم تمزج جيداً ثم يتم وضع قطرتين من العينة على شريحة العد ثم تترك في طبق بيتري يحتوي على قطعة قطن مبلله لمدة 15دقيقة ، ثم يتم عد الصفائح الدموية في الخمسة المربعات الوسطية الذي يتم فيهم عد الكريات الحمراء ، ثم يتم حساب عدد الصفائح الدموية باستخدام القانون التالي
Platelets Count= ( Platelets Number in 5 Sequers ) x 1000.
زيادة عدد الصفائح الدموية
يحدث نتيجة وجود نزيف في الدم او حالات نقص الحديد او بعض الامراض السرطانية او مشكلة ما في نخاع العظم وينتج عن زيادة عددها عن المعدلات الطبيعية انها قد تتجمع مع بعضها داخل مجري الدم
وهذا بالطبع قد يؤدي الي تكون جلطات الدم وقد تساهم أيضًا في عملية تصلب الشرايين .
•••• نقص اعداد الصفائح الدموية
وهذا قد يكون نتيجة للحمل او فشل في نخاع العظم او التهاب شديد او تضخم في الطحال او ننيجة لنزيف حاد وحمى الظنك.
#د_ناصر_مهيوب_العامري
@LabMed2017
د/ناصرمهيوب العامري
تحليل تكدس حجم الخلايا HCT/PCV
طريقة الفحص
عينة دم تحتوي على مانع تجلط .
يتم إملاء ثلثي الانبوبة الشعرية بالدم .
يتم سد احد اطراف الانبوبة الشعرية بالشمع او يتم حرق طرف الانبوبة الشعرية حتى يتم انسداد طرف الانبوبة الشعرية.
يتم وضع الانبوبة الشعرية في جهاز الفصل المركزي الأفقي .
يتم السنترة للانبوبة الشعرية بالجهاز بسرعة 3000دورة لمدة 15دقيقة.
يتم اخراج الانبوبة الشعرية وقراءة النتيجة بالمسطرة الخاصة بالهيماتوكريت .
ومن هذه الطريقة يمكن حساب الهيموجلوبين وذلك من خلال القانون التالي
HB=PCV/3 .
#د_ناصر_مهيوب_العامري
@LabMed2017
تحليل تكدس حجم الخلايا HCT/PCV
طريقة الفحص
عينة دم تحتوي على مانع تجلط .
يتم إملاء ثلثي الانبوبة الشعرية بالدم .
يتم سد احد اطراف الانبوبة الشعرية بالشمع او يتم حرق طرف الانبوبة الشعرية حتى يتم انسداد طرف الانبوبة الشعرية.
يتم وضع الانبوبة الشعرية في جهاز الفصل المركزي الأفقي .
يتم السنترة للانبوبة الشعرية بالجهاز بسرعة 3000دورة لمدة 15دقيقة.
يتم اخراج الانبوبة الشعرية وقراءة النتيجة بالمسطرة الخاصة بالهيماتوكريت .
ومن هذه الطريقة يمكن حساب الهيموجلوبين وذلك من خلال القانون التالي
HB=PCV/3 .
#د_ناصر_مهيوب_العامري
@LabMed2017
د/ناصرمهيوب العامري
تحليل الهيموجلوبين.
( طريقة سهلي )
يتم وضع كمية من الدم(قطرة من الدم) المحتوي على مادة مانعة للتجلط في انبوبة سهلي .
يتم التخفيف والمعايرة لعينة الدم في انبوبة سهلي بالمحلول الفسيولوجي HCL المخفف مع تقليب الانبوبة حتى يتم تساوي لون الانبوبة مع لون الانبوبتين الطرفيتين لجهاز سهلي ، ويكون التخفيف والقراءة مع الضوء الشديد.
تترك الانبوبة في الجهاز لمدة 5-7 دقائق .
يتم القراءة في الضوء الشديد .
اذا كان اللون للانبوبة بنفس اللون للانبوبتين الطرفيتين يتم تسجيل كمية الهيموجلوبين وذلك من خلال قراءة النسبة على انبوبة جهاز سهلي المرقمة .
اذا لم يكن اللون بنفس لون الانبوبتين الطرفيتين لجهاز سهلي يتم التخفيف بمحلول HCL حتى يتم تساوي الالوان ، ثم تسجل النتيجة او الكمية للهيموجلوبين من خلال الرقم الموجود على انبوبة سهلي .
#د_ناصر_مهيوب_العامري
@LabMed2017
تحليل الهيموجلوبين.
( طريقة سهلي )
يتم وضع كمية من الدم(قطرة من الدم) المحتوي على مادة مانعة للتجلط في انبوبة سهلي .
يتم التخفيف والمعايرة لعينة الدم في انبوبة سهلي بالمحلول الفسيولوجي HCL المخفف مع تقليب الانبوبة حتى يتم تساوي لون الانبوبة مع لون الانبوبتين الطرفيتين لجهاز سهلي ، ويكون التخفيف والقراءة مع الضوء الشديد.
تترك الانبوبة في الجهاز لمدة 5-7 دقائق .
يتم القراءة في الضوء الشديد .
اذا كان اللون للانبوبة بنفس اللون للانبوبتين الطرفيتين يتم تسجيل كمية الهيموجلوبين وذلك من خلال قراءة النسبة على انبوبة جهاز سهلي المرقمة .
اذا لم يكن اللون بنفس لون الانبوبتين الطرفيتين لجهاز سهلي يتم التخفيف بمحلول HCL حتى يتم تساوي الالوان ، ثم تسجل النتيجة او الكمية للهيموجلوبين من خلال الرقم الموجود على انبوبة سهلي .
#د_ناصر_مهيوب_العامري
@LabMed2017
د/ناصرمهيوب العامري
فحص سكر الفاطر بجهاز البايوكيميكال الحديث Spectro
الذي يعطينا النتائج تلقائياً دون عمليات حسابية يدوياً.
طريقة شركة Spinreact
يتم فصل عينة سيرم او بلازما من عينة دم المريض .
يتم إختيار نوع الفحص من قائمة ارقام الفحوصات الموجودة في الجهاز.
يتم وضع 1000ميكرون من المحلول في انبوبة التصفير ، ثم يتم تصفير الجهاز.
يتم تحضير انبوبة استاندر / انبوبة عيارية STD او Calibration
وذلك بوضع 1000ميكرون من محلول السكر في الانبوبة ثم نظيف 10ميكرون من محلول الاستاندر الخاص بالمحلول إلى الانبوبة.
يتم وضع 1000ميكرون من محلول السكر في انبوبة العينة،
ثم يتم وضع 10ميكرون من عينة السيرم او البلازما في الانبوبة .
يتم وضع الانبوبتين في مكان وضع الانابيب بالجهاز نفسه ليتم تحضينها بدرجة 37°c لمدة 10دقائق .
ثم يتم القراءة بالجهاز
تبدأ بالقراءة لانبوبة الاستاندر
ثم قراءة لانبوبة العينة .
يتم تسجيل النتيجة الظاهرة بشاشة الجهاز.
#د_ناصر_مهيوب_العامري
@LabMed2017
فحص سكر الفاطر بجهاز البايوكيميكال الحديث Spectro
الذي يعطينا النتائج تلقائياً دون عمليات حسابية يدوياً.
طريقة شركة Spinreact
يتم فصل عينة سيرم او بلازما من عينة دم المريض .
يتم إختيار نوع الفحص من قائمة ارقام الفحوصات الموجودة في الجهاز.
يتم وضع 1000ميكرون من المحلول في انبوبة التصفير ، ثم يتم تصفير الجهاز.
يتم تحضير انبوبة استاندر / انبوبة عيارية STD او Calibration
وذلك بوضع 1000ميكرون من محلول السكر في الانبوبة ثم نظيف 10ميكرون من محلول الاستاندر الخاص بالمحلول إلى الانبوبة.
يتم وضع 1000ميكرون من محلول السكر في انبوبة العينة،
ثم يتم وضع 10ميكرون من عينة السيرم او البلازما في الانبوبة .
يتم وضع الانبوبتين في مكان وضع الانابيب بالجهاز نفسه ليتم تحضينها بدرجة 37°c لمدة 10دقائق .
ثم يتم القراءة بالجهاز
تبدأ بالقراءة لانبوبة الاستاندر
ثم قراءة لانبوبة العينة .
يتم تسجيل النتيجة الظاهرة بشاشة الجهاز.
#د_ناصر_مهيوب_العامري
@LabMed2017
طــــاب مــســاكُــم وأوقــاتــكــم
بالــمــودة والــمــحــبــة والــسُــرور
سيتم إستكمال جميع الفحوصات الطبية والتحاليل الطبية
خلال الايام القادمة بإذن الله .
🌺🌺🌺🌺🌺🌺🌺🌺
بالــمــودة والــمــحــبــة والــسُــرور
سيتم إستكمال جميع الفحوصات الطبية والتحاليل الطبية
خلال الايام القادمة بإذن الله .
🌺🌺🌺🌺🌺🌺🌺🌺
{تــخــصُــصِــي الــطــبــي ذِكــــرى} .
{الــمــخــتــبــرات الــطــبــيــة الــعــامــةوالــتــحــالــيــل الــطــبــيــة الــشــامــلــة}.
🌺🌸🌺🌸🌺🌸🌺🌸🌺🌸🌺
{الــمــخــتــبــرات الــطــبــيــة الــعــامــةوالــتــحــالــيــل الــطــبــيــة الــشــامــلــة}.
🌺🌸🌺🌸🌺🌸🌺🌸🌺🌸🌺
<الامير> ®الشرعبي®:
تقنية الاليزا
Enzyme linked Immuno-sorbent Assay
ELISA
تعد تقنية Elisa من تقنيات المختبرية التشخيصية الواسعة الاستخدام في معظم مختبرات التحليلات المرضية و خاصة في تشخيص الفايروسات وذلك للاسباب التالية:
1. تحليل عدد كبير من العينات.
2. تستغرق وقت قليل نسبيا.
3. الحساسية (Sensitivity) العالية، حيث تبلغ 99%.
مبدأ عمل تقنية ELISA
تستند هذه التقنية على مبدأ Enzyme immunoassay EIA. في هذه التقنية تثبت الاضداد او المستضدات في حفر صفيحة بلاستيكية تدعى Microtiter plate. توضع عينات مصل المرضى وعينات السيطرة في حفر الـ microtiter plate فيحدث ارتباط بين الاضداد و المستضدات. و بعد ساعة من الحضانة في درجة حرارة الغرفة، تغسل الـصفيحة بواسطة محلول غسل خاص لازالة المواد غير المرتبطة. بعد ذلك يضاف انزيم مرتبط بجزيئة الضد Enzyme conjugate و يحضن لمدة نصف ساعة. وبعد خطة غسل اخرى يتم اضافة المادة الاساس Substrate وتحضن الصفيحة لمدة 20 دقيقة ، حيث يظهر لون (أزرق عادة) في الحفر. ثم يضاف بعد ذلك محلول Stop solution حيث يتغير اللون من الازرق الى الاصفر. تقاس شدة اللون باستخدام جهاز المطياف بطول موجي 450 nm. يتناسب تركيز الضد او المستضد المراد قياسه مع شدة اللون تناسبا طرديا.
المواد المطلوبة
1. Microtiter strips : تحتوي على الضد او المستضد مثبت في الحفر.
2. محاليل السيطرة القياسية Standards: وتتضمن :
• Negative control .
• Cut-off standard .
• Weakly positive control.
• Positive control.
3. Enzyme conjugate: يحتوي على اضداد مرتبطة مع انزيم Peroxidase .
4. TMB substrate solution : تحتوي على مادة TMB) Tetramethylbenzidine ).
5. TMB stop solution : ويحتوي على حامض الكبريتيك (H2SO4).
6. محلول التخفيف Sample diluents : ويحتوي على Phosphate buffer saline + potassium tetraiodomercurate (0.01%).
7. محلول الغسل Wash buffer : و يحتوي على Phosphate buffer saline.
8. Automatic pipette .
9. ماء مقطر.
10. جهاز مطياف خاص Microtiter spectrophotometer أو (ELISA reader) .
11. جهاز غسل Microtiter ELISA washer.
طريقة العمل:
1. يخفف مصل المرضى 1:100 بواسطة محلول التخفيف.
2. يخفف محلول الغسل بالماء المقطر 1:10.
3. توضع العينات و عينات السيطرة في حفر الـMicrotiter plate .
4. تغلف الـ Microtiter plate بغطاء بلاستيكي و تحضن بدرجة حرارة الغرفة لمدة 60 دقيقة.
5. تغسل الصفيحة بمحلول الغسل.
6. يضاف محلول Enzyme conjugate لكل حفرة.
7. تحضن الصفيحة 30 دقيقة بدرجة حرارة الغرفة.
8. تغسل الصفيحة.
9. يضاف محلول TMB substrate لكل حفرة.
10. تحضن الصفيحة لمدة 20 دقيقة.
11. يوقف التفاعل باضافة محلول TMB stop solution لكل حفرة.
12. ترج الصفيحة بهدوء وتقرأ النتائج بجهاز المطياف على طول موجي 450 nm .
التقييم الكمي Quantitative evaluation :
لاجل القيام بالتقييم الكمي للأضداد او المستضدات الخاصة بالفايروس المطلوب يتم عمل منحنى قياسي بين قيمة الكثافة الضوئية (O.D.)و تراكيز محاليل السيطرة القياسية، ومن خلال هذا المنحني يتم استخراج معادلة المنحني القياسي. وبذلك يمكن قياس تركيز الضد او المستضد اعتمادا على الكثافة الضوئية المقاسة بالمطياف.
التقييم النوعي Qualitative evaluation :
لاجل التقييم النوعي يتم قياس الـكثافة الضوئية لمصل المرضى و يقارن بقيمة الكثافة الضوئية لـCut-off standard . اذا كانت قيمة الكثافة الضوئية للعينة أّعٌلَئ
من قيمة cut-off تعتبر العينة موجبة. اما اذا كانت قيمة الكثافة الضوئية للعينة اقل من الـ cut-off فتعتبر العينة سالبة.
#منقول
-------------------
@LabMed2017
تقنية الاليزا
Enzyme linked Immuno-sorbent Assay
ELISA
تعد تقنية Elisa من تقنيات المختبرية التشخيصية الواسعة الاستخدام في معظم مختبرات التحليلات المرضية و خاصة في تشخيص الفايروسات وذلك للاسباب التالية:
1. تحليل عدد كبير من العينات.
2. تستغرق وقت قليل نسبيا.
3. الحساسية (Sensitivity) العالية، حيث تبلغ 99%.
مبدأ عمل تقنية ELISA
تستند هذه التقنية على مبدأ Enzyme immunoassay EIA. في هذه التقنية تثبت الاضداد او المستضدات في حفر صفيحة بلاستيكية تدعى Microtiter plate. توضع عينات مصل المرضى وعينات السيطرة في حفر الـ microtiter plate فيحدث ارتباط بين الاضداد و المستضدات. و بعد ساعة من الحضانة في درجة حرارة الغرفة، تغسل الـصفيحة بواسطة محلول غسل خاص لازالة المواد غير المرتبطة. بعد ذلك يضاف انزيم مرتبط بجزيئة الضد Enzyme conjugate و يحضن لمدة نصف ساعة. وبعد خطة غسل اخرى يتم اضافة المادة الاساس Substrate وتحضن الصفيحة لمدة 20 دقيقة ، حيث يظهر لون (أزرق عادة) في الحفر. ثم يضاف بعد ذلك محلول Stop solution حيث يتغير اللون من الازرق الى الاصفر. تقاس شدة اللون باستخدام جهاز المطياف بطول موجي 450 nm. يتناسب تركيز الضد او المستضد المراد قياسه مع شدة اللون تناسبا طرديا.
المواد المطلوبة
1. Microtiter strips : تحتوي على الضد او المستضد مثبت في الحفر.
2. محاليل السيطرة القياسية Standards: وتتضمن :
• Negative control .
• Cut-off standard .
• Weakly positive control.
• Positive control.
3. Enzyme conjugate: يحتوي على اضداد مرتبطة مع انزيم Peroxidase .
4. TMB substrate solution : تحتوي على مادة TMB) Tetramethylbenzidine ).
5. TMB stop solution : ويحتوي على حامض الكبريتيك (H2SO4).
6. محلول التخفيف Sample diluents : ويحتوي على Phosphate buffer saline + potassium tetraiodomercurate (0.01%).
7. محلول الغسل Wash buffer : و يحتوي على Phosphate buffer saline.
8. Automatic pipette .
9. ماء مقطر.
10. جهاز مطياف خاص Microtiter spectrophotometer أو (ELISA reader) .
11. جهاز غسل Microtiter ELISA washer.
طريقة العمل:
1. يخفف مصل المرضى 1:100 بواسطة محلول التخفيف.
2. يخفف محلول الغسل بالماء المقطر 1:10.
3. توضع العينات و عينات السيطرة في حفر الـMicrotiter plate .
4. تغلف الـ Microtiter plate بغطاء بلاستيكي و تحضن بدرجة حرارة الغرفة لمدة 60 دقيقة.
5. تغسل الصفيحة بمحلول الغسل.
6. يضاف محلول Enzyme conjugate لكل حفرة.
7. تحضن الصفيحة 30 دقيقة بدرجة حرارة الغرفة.
8. تغسل الصفيحة.
9. يضاف محلول TMB substrate لكل حفرة.
10. تحضن الصفيحة لمدة 20 دقيقة.
11. يوقف التفاعل باضافة محلول TMB stop solution لكل حفرة.
12. ترج الصفيحة بهدوء وتقرأ النتائج بجهاز المطياف على طول موجي 450 nm .
التقييم الكمي Quantitative evaluation :
لاجل القيام بالتقييم الكمي للأضداد او المستضدات الخاصة بالفايروس المطلوب يتم عمل منحنى قياسي بين قيمة الكثافة الضوئية (O.D.)و تراكيز محاليل السيطرة القياسية، ومن خلال هذا المنحني يتم استخراج معادلة المنحني القياسي. وبذلك يمكن قياس تركيز الضد او المستضد اعتمادا على الكثافة الضوئية المقاسة بالمطياف.
التقييم النوعي Qualitative evaluation :
لاجل التقييم النوعي يتم قياس الـكثافة الضوئية لمصل المرضى و يقارن بقيمة الكثافة الضوئية لـCut-off standard . اذا كانت قيمة الكثافة الضوئية للعينة أّعٌلَئ
من قيمة cut-off تعتبر العينة موجبة. اما اذا كانت قيمة الكثافة الضوئية للعينة اقل من الـ cut-off فتعتبر العينة سالبة.
#منقول
-------------------
@LabMed2017